华南理工大学食物科学与工程学院教诲娄文勇团队正在斟酌中初次挖掘了异戊烯醇欺压酿酒酵母呼吸感化的表象,并针对该表象会导致人为合成萜类化合物途径恶果低的题目,提出萜类化合物合成新战术,明显晋升酿酒酵母适配性。相干成绩即日正在线颁发于《天然-通信》(
“咱们通过促使菌株的孕育与人为合成途径耦合,开荒了一种简明、牢靠、高效的高通量筛选设施,利用于酶的定向进化,大幅加强了萜类化合物的合成恶果。”论文通信作家娄文勇显示,该斟酌告捷处置了酿酒酵母代谢与萜类化合物人为合成途径适配性差的题目,可能有用胀吹人为合成途径正在酿酒酵母中的利用。
据先容,萜类化合物是天然界中最普及散布的一类自然产品,普及利用于食物、化妆品、医疗保健等周围。异戊烯醇使用(IU)途径是用于合成萜类化合物的人为道途。目前,大肠杆菌是这一途径的首要表达宿主,但因为菌种安好性较差,限定了其正在工业中的普及利用。
华南理工大学食物科学与工程学院博士生李广健显示,比拟之下,酿酒酵母行动一种公认的安好菌株,是合成萜类化合物的理念平台。为明晰决酿酒酵母正在合成途径中恶果低的题目,娄文勇教诲团队开始通过转录组学本事,挖掘异戊烯醇底物欺压了酿酒酵母的呼吸感化。针对该表象,团队提出以人为途径代庖自然途径的菌株战术,使得菌株的孕育与合成萜类化合物的人为道途耦合,“迫使”细胞加强呼吸感化,以维护孕育生息。
使用AtIPK和SmDAGK两个枢纽酶,该斟酌修筑了依赖于IU途径的菌株战术,使得IU途径与细胞孕育耦合,“迫使”细胞抬高ATP合成,进而晋升IU途径恶果。对AtIPK和SmDAGK两个酶共46个位点随机饱和突变后,团队告捷筛选出恶果抬高153%的有用突变体SmDAGK-S47A、L124A,以及AtIPK-S270P、A272R。
“咱们提出的适配战术拥有通用性,为高价格萜类化合物的合成供应了的确可行的时间接济。”论文协同通信作家、华南理工大学食物科学与工程学院副教诲曹宇飞显示。借帮该战术,斟酌团队合成了三种常见萜类化合物——柠檬烯、角鲨烯和β-胡萝卜素。与对比组比拟,其合成恶果分袂抬高了695倍、850倍和18倍,填塞浮现出该类菌株正在萜类化合物合成方面的广大利用潜力。
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